CYTOLOGICAL HYBRIDIZATION
см. in situ hybridization
* * *
In situ-гибридизация, цитологическая г. — метод идентификации специфических последовательностей ДНК в интактных хромосомах путем гибридизации с радиоактивно меченным комплементарным зондом. В качестве зонда часто используются синтетические олигонуклеотиды. Для этого биологический материал раздавливается на предметном стекле для микроскопирования, ДНК денатурируется (см. Денатурация) и затем гибридизируется с меченным по тритию зондом. На препарат наслаивается фотографическая эмульсия и на радиоавтографах устанавливается место гибридизации. Гибридизация может также осуществляться с нерадиоактивной меткой (напр., биотинилирование нуклеиновых кислот, см.). In situ-г. широко используется для точной локализации клонированных генов на политенных хромосомах (напр., у дрозофилы), а также для локализации транскриптов специфических генов в клетках и тканях. Данный метод разработан в 1969 г. на материале ооцитов шпорцевой лягушки независимо друг от друга двумя группами исследователей — Г. Джона с сотр. и Дж. Галла и М. Пэрдью.