EXPRESSION OF POLYMERASE CHAIN REACTION
Экспрессия ПЦР — техника, объединяющая ПЦР, или полимеразную цепную реакцию, с транскрипцией и трансляцией in vitro определенного фрагмента ДНК (гена) с тем, чтобы получить амплифицированный продукт (белок) (см. Амплификация). Для этого интересующий ген сначала амплифицируют с помощью ген-специфичного смыслового и антисмыслового праймеров. 5'-конец смыслового праймера содержит область из 12 перекрывающихся п. о. После процедуры амплификации этот участок удлиняется с помощью Taq-полимеразы путем присоединения экспрессионной кассеты, содержащей сайт инициации транскрипции для Т 7 РНК-полимеразы, 5'-нетранслируемую лидерную последовательность из вирусного гена и стартовый кодон ATG. Лидерная последовательность, в свою очередь, несет сайт для связывания с рибосомами. Затем такая рекомбинантная молекула амплифицируется с помощью универсального и антисмыслового праймеров. Образующийся ПЦР-продукт in vitro транскрибируется в иРНК, а затем транслируется в белок.